如何通过流式细胞仪得到多发性骨髓瘤MRD的高质量结果？

为了解MM 的生物学和临床方面而进行的日益全面的研究工作，促进了新的方案、药物和治疗方法的发展，从而显著提高了完全缓解（CR）率。因此，需要有更好的策略来检测和定义低水平的疾病，并预测长期结果。治疗期间未被根除的残留肿瘤性 PC（也称为可测量的残留病，MRD）的数量可能比例很低，从而不容易被形态学或其它常规技术发现。为了更好地对患者进行分层，已经开发了分子和流式细胞检测 MRD 的方法，检测灵敏度为0.001%-0.0001%。

MM患者MRD评估的临床意义早有报道，多参数流式细胞术（MFC）MRD 阴性已被公认为预测长期良好结果的有力指标。MFC被证明具有更高的适用性（适用于>95%的患者）、更广泛的可用性、更简单的仪器设置、更短的报告时间（<6 小时）、更好的可重复性，并允许定量评估抗原表达水平以进行表型分析。

为了可靠地应用流式方法来评估极低含量的骨髓瘤细胞，方法开发需要考虑以下多种因素来保证检测准确性和检测灵敏度：

a.骨髓采集量

b. 治疗后 MRD 评估的最佳时间点

c. 疾病的局灶性

d. 骨髓样本的运输和储存条件

e. 用于识别正常与异常 PC 的抗体克隆选择

f. 既往用过抗体药物的免疫疗法

g. 骨髓细胞前处理方法

h. 获取数百万事件的方案条件优化

i. 数据分析和结果解读策略

在这里，我们重点讨论标本采集、样品处理、方案设计、抗体克隆的选择、质量控制和建立 LOD 和 LLOQ 的方法。